SELEÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS PRODUTORAS DE METABÓLITOS ANTIBACTERIANOS E ANTIFÚNGICOS
Resumen
Introdução: A resistência dos microrganismos aos antimicrobianos tem sido de ampla preocupação mundial, principalmente na era pós COVID-19. Diversos microrganismos, isolados de diferentes locais, têm sido associados à produção de compostos metabólicos eficazes contra uma ampla gama de microrganismos patogênicos. Objetivo: Frente a este contexto, o presente trabalho teve como objetivo caracterizar a atividade antimicrobiana de microrganismos isolados previamente de locais pouco explorados. Metodologia: Inicialmente foi feito um screening da atividade antimicrobiana com 32 isolados de diferentes locais (cogumelos- COG, esterco de galinha- EG, caldo de cana- CC, leite de gado- LG, arroz fermentado- IB e suco de abacaxi- AX), utilizando a metodologia de sobreposição em ágar (agar overlay), contra diferentes indicadores patogênicos padrão (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas sp., Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus epidermidis, Acinetobacter baumanii, Candida albicans, C. parapsilosis e C. tropicalis) usando o metodo de sobreposição em ágar (overlay). Os isolados potenciais foram cultivados em meio de cultura líquido para a obtenção dos sobrenadantes bacterianos e posterior análise da atividade destes através do método de difusão em poços. Para identificação molecular, foram extraídos, amplificados e sequenciados o DNA na região 16s rRNA dos isolados. 8 isolados apresentaram perfil de inibição bacteriana, sendo os que inibiram uma quantidade maior de indicadores, em ordem crescente: IB-4.1, seguido de LG e CC-6, com maior inibição para K. pneumoniae. Resultados: Dos isolados do cogumelo, todos apresentaram atividade de amplo espectro, assim como contra leveduras como C. albicans, tendo COG-A5 apresentado inibição contra mais indicadores. Para o teste de difusão, o isolado COG-A5 apresentou inibição contra S. aureus, E. coli e Pseudomonas sp. Além deste, outros 2 isolados IB 4.1 e COG-O2 inibiram S. aureus e C. albicans, respectivamente. As diferenças de atividade entre ambos os testes se dão devido às diferenças de condições às quais os isolados foram submetidos, justificando que as condições de estresse microbiano são favoráveis à expressão da atividade antimicrobiana. Os amplicons de IB-4.1, COG-O2, CC6, COG-A7, COG-A5 apresentaram valores de, aproximadamente, 1500 pb (pares de bases), enquanto os amplicons de LG e EG apresentaram valores de, aproximadamente, 1000 pb. Os isolados LG e EG foram sequenciados e as sequências genéticas foram comparadas com as depositadas no GenBank na plataforma do NCBI (National Center for Biotechnology Information) e mostraram similaridade de com Enterococcus faecium (98,10%) e Pseudomonas monteilii (99,07%), respectivamente. Conclusão: Sendo assim, pode ser concluído que os microrganismos isolados neste trabalho, possuem potencial para geração de futuros antimicrobianos a serem utilizados frente aos convencionais, sendo necessários mais estudos que explorem o perfil químico assim como a purificação desses metabólitos bacterianos para sua utilização industrial.
PALAVRAS-CHAVE: Antimicrobianos, Isolamento bacteriano, Metabólitos bacterianos.
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